Termocicladores de tiempo real
El uso de un termociclador de tiempo real PCR
Un termociclador en tiempo real, también conocido como termociclador cuantitativo en tiempo real o PCR en tiempo real, es un equipo utilizado en biología molecular para realizar la reacción en cadena de la polimerasa (PCR) con el fin de amplificar y cuantificar secuencias específicas de ácidos nucleicos en tiempo real durante el proceso de amplificación.
A diferencia de un termociclador convencional utilizado en la PCR convencional, que solo permite visualizar el resultado de la PCR al final del ciclo de amplificación, un termociclador en tiempo real permite monitorear la amplificación de ADN en tiempo real a medida que ocurre, proporcionando datos cuantitativos sobre la cantidad de ADN presente en la muestra en cada ciclo de amplificación.
Características y funciones clave:
- Detección fluorescente: El termociclador en tiempo real utiliza sondas fluorescentes específicas o colorantes intercalantes que se unen al ADN amplificado durante la PCR. A medida que aumenta la cantidad de ADN amplificado, aumenta la intensidad de la señal fluorescente, lo que permite cuantificar la cantidad de ADN presente en la muestra.
- Ciclo de amplificación: Durante el ciclo de amplificación, el termociclador en tiempo real realiza una serie de ciclos de calentamiento y enfriamiento controlados para desnaturalizar, aparear y amplificar secuencias específicas de ADN. A medida que progresa la PCR, el termociclador monitorea continuamente la intensidad de la señal fluorescente en cada ciclo.
- Curva de amplificación: El termociclador en tiempo real genera una curva de amplificación que representa la cantidad de ADN amplificado en función del número de ciclos de PCR. Esta curva permite determinar la cantidad inicial de ADN presente en la muestra y calcular la eficiencia de la amplificación.
- Análisis de punto final y tiempo real: Además de proporcionar datos cuantitativos en tiempo real durante la PCR, el termociclador en tiempo real también puede realizar análisis de punto final al final de la PCR para evaluar la especificidad y la eficiencia de la amplificación.
- Aplicaciones: Los termocicladores en tiempo real se utilizan en una amplia variedad de aplicaciones en biología molecular, incluyendo la cuantificación de expresión génica, la detección y cuantificación de patógenos, la genotipificación, la determinación de la carga viral, el análisis de mutaciones genéticas, entre otros.
Equipo de PCR en Tiempo Real Mx 3005P
Equipo de PCR en Tiempo-Real con 5 filtros completamente seleccionables por el usuario y totalmente abierto para poder trabajar con cualquier química y fluoróforo disponible actualmente en le mercado. Incluye el software de análisis más potente del mercado y es el único equipo que realmente puede realizar el análisis de los resultados en tiempo real, sin necesidad de esperar a que termine la reacción. Puesto que no necesita utilizar un fluoróforo de referencia para normalizar los resultados, permite la posibilidad de realizar multiplex de hasta 5 fluoróforos simultáneamente.
Características del tremociclador en tiempo real MX 3005P
- Multiplexing: lectura de hasta 5 fluoróforos en el mismo tubo.
- Apto para trabajar con todas las químicas disponibles comercialmente: SYBR Green, Taqman, FRET, Molecular Beacons, Scorpions, LNA.
- Velocidad de amplificación: posibilidad de FAST PCR mediante el uso de Kits “Full Velocity”. Una reacción de QPCR estándar de 40 ciclos de 2 pasos se completa en 52 minutos.
- Permite la visualización y el análisis y de los datos en tiempo real según van siendo generados durante la realización de un ensayo.
- Permite la realización de curvas de estándares para varios fluoróforos en una misma gráfica.
- Análisis de curvas de disociación con cálculo automático de las Tm.
- Todos los resultados se pueden exportar en formato numérico a Excel, en formato de gráficas a PowerPoint o como imagen directamente.
- Incluye software de diseño de sondas y primers Beacon Designer 3.01
- Actualizaciones gratuitas del paquete de software.
- Número ilimitado de licencias de software.
- Fuente de excitación: lámpara halógena de cuarzo-tungsteno.
- Detector: un fotomultiplicador.
- Sistema de filtros: 2 ruedas de filtros con 5 filtros cada una.
- Formato de tubo/placa: placas de 96 pocillos, tiras de 8 tubos o tubos de 0,2L.
- Rango dinámico: 10 órdenes de magnitud.
- Rango de excitación: 350 - 750nm; Rango de emisión: 350 - 700nm.
- Uniformidad de temperatura dentro del bloque: ±0,25°C a 72ºC.
En resumen, un termociclador en tiempo real es un equipo avanzado utilizado en biología molecular para realizar la PCR en tiempo real, permitiendo la amplificación y cuantificación simultánea de secuencias específicas de ADN durante el proceso de amplificación. Esto proporciona datos cuantitativos precisos y sensibles sobre la cantidad de ADN presente en la muestra.